钙结合序列调控钙钙素-2与早老素-2的相互作用。
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朱杰，Stabler SM, Ames JB, Baskakov I, Monteiro MJ
钙结合序列调控钙钙素-2与早老素-2的相互作用。
生物医学工程学报，2004,11(2):444 - 444。
- PubMed ID
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15475008 (PubMed视图］
- 摘要
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Calmyrin是一种肉豆蔻酰基化的钙结合蛋白，含有四个ef -手。Calmyrin与许多蛋白质相互作用，包括早老素-2 (PS2)。然而，calmyrin的生物物理特性以及调节其与不同伴侣结合的分子机制尚不清楚。通过定点诱变和Ca2+结合研究，我们发现calmyrin结合两个Ca2+离子，解离常数约为53微米，两个c端ef -手3和4结合钙。通过紫外光谱，圆二色性(CD)和核磁共振，我们发现游离Ca(2+)和结合Ca(2+)的calmyrin具有明显不同的蛋白质构象。通过酵母双杂交实验，我们发现calmyrin的ef -手3和4必须是完整的，calmyrin才能与PS2-loop序列相互作用。对转染calmyrin表达构建体的HeLa细胞的脉冲追踪研究表明，野生型(Wt) calmyrin的半衰期约为75分钟，而肉豆蔻酰化缺陷突变体的半衰期更快(35分钟)。相比之下，EF-hand 3或EF-hand 4突变体的半衰期分别为52分钟和170分钟。利用转染了Wt和突变型calmyrin cdna的HeLa细胞的免疫荧光染色，我们发现钙结合和肉豆肉酰化对calmyrin的细胞内动态靶向都很重要。双免疫荧光显微镜显示，Wt和豆芽糖酰基化缺陷的calmyrin蛋白与PS2有效共定位，且与PS2的共定位程度相同，而钙结合缺陷的calmyrin突变体与PS2的共定位程度较低。 Our results suggest that calmyrin functions as a calcium sensor and that calcium binding sequences in calmyrin are important for interaction with the PS2 loop.